Спороциды — это химические вещества, которые убивают споры бактерий. Споры бактерий (родов Clostridium, Bacillus) значительно более резистентны, чем все вегетативные формы бактерий, включая Mycobacterium, а также вирусы, грибы и простейшие. Поэтому спороциды применяются для так называемой химической стерилизации. Более точно этот процесс следует называть «дезинфекцией высокого уровня», а спороцидность является атрибутом дезинфектантов высокого уровня, к которым относят перекись водорода (6%), глютаральдегид (2%), надуксусную кислоту (5%).
Антисептические препараты, производящие деконтаминацию кожи, слизистых и раневых поверхностей человека, относят к дезинфектантам низкого или среднего уровня, убивающим вирусы, бактерии простейшие, но не споры бактерий.
В то же время, спороцидность является чрезвычайно важным свойством дезинфектантов кожи, применяемых в хирургической практике, так как операционное поле, руки хирургов и медицинского персонала должны быть свободны от спор бактерий, в частности, способных вызвать столбняк или газовую гангрену.
Группа гуанидиновых дезинфектантов является производными гуанидина. Гуанидиновые соединения широко распространены в живой природе, например, являются компонентами нуклеиновых кислот. Известны лекарственные препараты на основе гуанидиновых соединений: стрептомицин, фарингосепт.
Полимерные дезинфектанты на основе гуанидина являются производными полигексаметиленгуанидина (ПГМГ). Это высокоэффективные противомикробные и безопасные для человека и животных биоцидные препараты, нетоксичные, неаллергенные, водорастворимые, сохраняют стабильность и антимикробную активность длительное время.
Цель работы — определение спороцидных свойств у нового кожного антисептика «Тефлекс А», производного ПГМГ-хлорида
Материалы и методы:
Испытано новое производное ПГМГ «Тефлекс А», разработанное фирмой ЗАО «Софт-Протектор» и сертифицированное в качестве кожного антисептика в 2007 г.
Средство «Тефлекс А» представляет собой прозрачную жидкость светло-желтого цвета с действующим веществом — модификацией ПГМГ в концентрации водного раствора 0,4%, pH 6,5 ± 1,0.
«Тефлекс А» испытан на токсичность и безопасность в соответствии с ГОСТ 12.1.007−76 (п. 1.2, 1.3), «Нормативные показатели безопасности и эффективности дезинфекционных средств, подлежащие контролю при проведении обязательной сертификации» № 01−12/75−97 (п. 1.1 — 1.7, 2.1 — 2.9); МУ 1.2.1105−02 и «Методы испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности» М., 1998, ч.1,2. в Аккредитованном испытательном центре ФГУ «РНИИТО им. Р. Р. Вредена Росмедтехнологий».
Параметры оценки включали острую токсичность при введении в желудок, на неповрежденную кожу, при ингаляции, на слизистые, аллергенные свойства (ГНТ, ГЗТ). По изученным параметрам средство «Тефлекс А» относится к IV классу мало опасных веществ, не обладает раздражающим действием на кожу, не обладает сенсибилизирующей активностью.
Вирулоцидные свойства препарата изучены в суспензионных опытах с тест — вирусами: аденовирусом 6 серотипа, вирусом полиомиелита 1 типа и вирусом гепатита В в культуре клеток Hep-2 методами световой микроскопии и методами флюоресцирующих антител и ПЦР в экспертной лаборатории МЗРФ «Городского диагностического вирусологического центра СПб» и в Аккредитованном Испытательном лабораторном центре (ИЛЦ) ФГУ «РНИИТО им. Р. Р. Вредена Росмедтехнологий».
Антибактериальные и антифунгальные свойства препарата in vitro определяли против Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Escherichia coli, Candida albicans, Penicillium chrysogenum и Aspergillus fumigatus в Испытательном центре кафедры микробиологии СПбГМА им. И. И. Мечникова.
Экспертная оценка антисептических свойств «Тефлекс А» in vivo была проведена в Аккредитованном Испытательном лабораторном центре (ИЛЦ) ФГУ «РНИИТО им. Р. Р. Вредена Росмедтехнологий» с участием 15 испытателей в условиях искусственного обсеменения поверхности рук взвесью тест-культуры E. coli, в отношении естественной микрофлоры рук, при обработке рук хирургов, кожи инъекционного и операционного поля.
Спороцидная активность «Тефлекса А» против бактериальных эндоспор определялась в 3-х независимых лабораториях:
В Аккредитованном Испытательном лабораторном центре (ИЛЦ) ФГУ «РНИИТО им. Р. Р. Вредена Росмедтехнологий» в 2008 году в отношении спор тест — штамма Clostridium perfringens № 276 чашечно-суспензионным методом при микробной нагрузке 105 КОЕ/мл и 107 КОЕ/мл при времени действия препарата 10 сек, в том числе в условиях органической нагрузки (50% сыворотки).
Laboratory of Hygiene and Microbiology, Dept. of Public Health, University of Helsinki в 2006 году проводила исследования спороцидной активности в соответствии с европейским стандартом EN 13 704 IDS с тест-штаммом Bacillus subtilis (АТСС 6633) суспензионным методом
Prince Edward Island Food Technology Center, Bedfordshire, England. Исследования проводились в декабре 2007 года с тест-штаммом Clostridium difficile (АТСС 9689) суспензионным методом с временем контакта с препаратом от 28 сек до 15 мин.
Результаты:
В стандартных испытаниях антисептик «Тефлекс А» в рабочей концентрации оказывает микробоцидное действие на вирусы (аденовирус, полиовирус, вирус гепатита B), грам-положительные и грам-отрицательные бактерии, дрожжеподобные и плесневые грибы, а также на микобактерии. Количество клеток бактерий грибов и вирионов в результате контакта с препаратом снижается в 105 — 106 раз, что подтверждает его высокую дезинфицирующую активность. Согласно методикам немецкого общества гигиены и микробиологии способность дезинфектанта инактивировать вирус гепатита B также дает информацию о его эффективности против ВИЧ.
В опытах in vivo, проведенных в Аккредитованном Испытательном лабораторном центре (ИЛЦ) ФГУ «РНИИТО им. Р. Р. Вредена Росмедтехнологий» обработка рук в течение 15 сек препаратом «Тефлекс А» приводила к 100% гибели нанесенной на кожу тест-культуры E. coli, уровень естественной микрофлоры снижался на 95,6 — 98,5%. Обработка рук хирургов и операционного поля с участием испытателей была высокоэффективной с достижением 100% элиминации естественной микрофлоры и тести-культуры E. coli. При обработке кожи инъекционного поля методом орошения или притиранием достигалось снижение микробной контаминации на 99,99%.
Таким образом, полученные в экспериментах in vivo и in vitro результаты подтверждают соответствие средства «Тефлекс А» (Россия) российским нормативным требованиям к кожному антисептику.
В 2007 — 2008 гг. проведены исследования in vitro по оценке спороцидной активности средства «Тефлекс А» в отношении бактериальных спор. Испытание в Аккредитованном Испытательном лабораторном центре (ИЛЦ) ФГУ «РНИИТО им. Р. Р. Вредена Росмедтехнологий» показало, что при рабочей концентрации действующего вещества 0,4% «Тефлекс А» вызвал 100% гибель спор Clostridium perfringens при концентрации 105 КОЕ/мл и 99,9% гибель при концентрации 107 КОЕ/мл, что соответствует в среднем редукции спор в 104 раз.
При оценке спороцидной активности в Испытательном центре Англии было показано, что при исследовании взвеси Cl. difficile в концентрации 5 * 106 при рабочей концентрации «Тефлекс А» 0,4% через 28 секунд наступало полное уничтожение клеток Cl. difficile.
Оценка спороцидной активности «Тефлекс А» в лаборатории Университета Хельсинки против спор B. subtilis подтвердила высокую спороцидную активность, составлявшую более 10-5 КОЕ/мл.
Обсуждение:
ПГМГ является полимером, обладающим сильным биоцидным действием в отношении вирусов, бактерий, грибов (дрожжеподобных и мицелиальных, включая споры и конидии грибов).
В России зарегистрированы и разрешены к применению аналоги на основе ПГМГ препараты Полисепт (полигексаметиленгуанидин-гидрохлорид) и Фогуцид (полигексаметиленгуанидин-фосфат) для целей дезинфекции в быту, на предприятиях пищевой промышленности и в медицинских учреждениях. На основе ПГМГ разработаны и выпускаются высокоэффективные моюще-дезинфицирующие средства: БИОР, АВАНСЕПТ, Славин (Белоруссия). В 2004 году фирмой ЗАО «Софт-Протектор» в 2004 году зарегистрировало новое дезинфицирующее средство на основе ПГМГ «Тефлекс-Дез».
В 2008 году зарегистрировано в качестве нового антисептика средство «Тефлекс А», синтезированное в ЗАО «Софт-Протектор» (Санкт-Петербург) на основе ПГМГ-гидрохлорида. Новое средство «Тефлекс А» предназначено для обработки рук хирургов, операционных медицинских сестер, акушерок и других лиц, участвующих в проведении операций, приеме родов; локтевых сгибов доноров, а также для обработки кожи операционного и инъекционного полей пациентов ЛПУ: для гигиенической обработки рук медицинского персонала ЛПУ, медицинских работников детских дошкольных и школьных учреждений, учреждений соцобеспечения, работников химико-фармацевтических, биотехнологических и парфюмерно-косметических предприятий, санаторно-курортных учреждений, предприятий общественного питания, объектов коммунальных служб, а также для гигиенической обработки кожи рук и инъекционного поля населением в быту.
В опытах in vitro и в испытаниях in vivo подтверждена высокая биоцидная эффективность препарата в рабочей концентрации против вирусов (тест-объекты: аденовирус, полиовирус, вирус гепатита B), против грам-положительных (Staph. aureus, Bac. cereus) и грам-отрицательных бактерий (E. coli, Pseud. aeruginosa, Proteus mirabilis), дрожжеподобных грибов (Candida albicans), плесневых грибов (рода Aspergillus, Penicillium), а также против микобактерий (Mycobacterium B5).
Сравнение активности «Тефлекс А» с 18 наиболее популярными в России антисептиками (АХД 2000 — специаль, Amphisept, хлоргексидина раствор 0,05%, люголя раствор с глицерином, протаргола раствор 2%, мирамистина раствор 0,01%, йодинол, эфирное масло чайного дерева, раствор борной кислоты 3%, фукарцин, йода раствор 5%, бриллиантового зеленого раствор 1%, масло Тимиана Кочи, масло эвкалиптовое, масло мятное, тминное масло, фурацилина раствор 0,02%, раствор спирта 70%) показало, что по антибактериальной и антигрибковой активности он находится в группе из 4-х таких наиболее активных препаратов, как АХД 2000 — специаль, хлоргексидина раствор 0,05%, раствор йода 5%.
Помимо высокой активности препарата против вегетативных форм бактерий, установлено его высокое (до 10-4 — 10-5) спороцидное действие против эндоспор бактерий родов Bacillus и Clodosporium.
Мы считаем, что по полученным нами совокупным данным, «Тефлекс А» как новый спороцидный вариант ПГМГ, следует отнести к дезинфектантам высокого уровня и расширить его применение для дезинфекции высокого уровня и химической стерилизации медицинских инструментов и эндоскопов, не подлежащих стерилизации в условиях высоких температур.
Выводы:
«Тефлекс А» зарегистрирован в России в 2008 году как новый кожный антисептик и является водорастворимым полимерным биоцидом, относящимся к 4 классу опасности.
«Тефлекс А» высокоэффективен в отношении вирусов, Грам (+) и Грам (-) бактерий, микобактерий, мицелиальных и дрожжеподобных грибов как in vitro, так и в экспертных опытах на людях.
«Тефлекс А», как новая модификация ПГМГ, проявляет сильные спороцидные свойства против эндоспор бактерий рода Clostridium и Bacillus, вызывая их редукцию до 10-4 — 10-6.
Антимикробные и спороцидные свойства позволяют отнести препарат к дезинфектантам высокого уровня с соответствующим применением в медицине для целей антисептики и для химической стерилизации инструментов.
Литература:
Гембицкий П.А., Воинцева И. И. Полимерный биоцидный препарат ПГМГ. Запорожье: Полиграф, 1998, с. 44
Галынкин В.А. и др. Дезинфекция и антисептика в промышленности и медицине. Санкт-Петербург, Фолиант, 2004 г., с. 96
Васильев О.Д., Светлов Д. А., Сдобнова М. Г. «Тефлекс» — новый полимерный антифунгальный дезинфектант. Проблемы медицинской микологии, т. 7, № 2, Санкт-Петербург, 2005 г., с. 97 — 98.