В работе были использованы музейные штаммы бактерий: Bacillus subtilis (ATCC 6633) и Bacillus cereus (619). Дезинфекционную активность препарата «Тефлекс А» оценивали по отношению к споровой форме обеих культур.

Спороцидную активность препарата «Тефлекс А» оценивали следующими методами:
- по величине зоны отсутствия роста микроорганизмов (зона лизиса) после нанесения капель тестируемого препарата на поверхность агара с газоном B. сereus.
Чашки помещали в термостат при температуре +30±10С. Степень дезинфицирующей активности тестируемых растворов оценивали по зонам лизиса .
- количественного суспензионного теста.
Споровую суспензию Bacillus subtilis (1×107 КОЕ/мл) в объеме 1 мл смешивали с раствором БСА (0,3 г/л), инкубировали в течение 2 минут на водяной бане при температуре +20±20С. Затем добавляли 8 мл 0,5% раствора препарата «Тефлекс А». Контакт дезинфектанта со спорами осуществляли при постоянном перемешивании при температуре +20±20С. После окончания экспозиции действие дезинфектанта останавливали раствором нейтрализатора (30г/л полисорбата-80 +3 г/л лецитина). Каждую пробу раститровывали методом серийных разведений и проводили высев на твердый питательный агар Хоттингера. Чашки помещали в термостат при температуре +30±10С. Оценку спороцидной активности препарата проводили производя подсчет КОЕ.
Споровую суспензию Bacillus cereus (5×106 КОЕ/мл) в объеме 1 мл смешивали с 1 мл 0,1% раствора препарата «Тефлекс А». Контакт дезинфектанта со спорами осуществлялся при постоянном перемешивании при температуре +20±20С. Остановку дезинфицирующего воздействия препарата на споры Bacillus cereus по истечении времени контакта осуществляли путем отмывки в 10-кратном объеме стерильной дистиллированной воды с последующим центрифугированием и ресуспендированием бактериального осадка спор в 2 мл стерильной дистиллированной воды. Затем каждую пробу раститровывали методом серийных разведений и проводили высев на твердый питательный агар Хоттингера. Чашки помещали в термостат при температуре +30±10С. Оценку спороцидной активности препарата проводили производя подсчет КОЕ.
- электронно-световой микроскопии.
Образцы спор B. cereus, после воздействия дезинфектанта, фиксировали в течение 10−12 часов при температуре +40C в 2,5% растворе глютаральдегида на фосфатном буфере (0,15 М, pH — 7,2). Затем два раза промывали в фосфатном буфере и постфиксировали в 1% водном растворе OsO4 в течение 4 часов. После выдержки образцы двукратно промывали стерильной дистиллированной водой, затем их обезвоживали в серии растворов этанола восходящей концентрации (30%, 50%, 70%, 96%). Время выдержки образца для каждой концентрации этанола составляло 60 минут. Далее спирт в образцах замещали окисью пропилена.
Пропитывание образцов эпоксидной смолой Araldite проводили по следующей схеме:
- Araldite + окись пропилена в соотношении 1/3 — 2 часа при комнатной температуре.
- Araldite + окись пропилена в соотношении 1/1 — 2 часа при комнатной температуре.
- Araldite + окись пропилена в соотношении 3/1 — 2 часа при комнатной температуре.
- Araldite- 2 часа при температуре 500 C.
Затем образцы помещали в специальные формы и заливали свежей порцией эпоксидной смолы Araldite. Полимеризацию смолы проводили при температуре 600C в термостате в течение 8 часов.
Из заливочных блоков готовили ультратонкие срезы с помощью алмазного ножа на ULTRATOME III (LKB). Полученные срезы контрастировали 1% водным раствором уранилацетата в течение 10 минут, затем цитратом свинца (по Рейнольдсу) в течение 5 минут. Готовые препараты просматривали на электронном просвечивающем микроскопе JEM-100C при ускоряющем напряжении 80 kV.